Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDI Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400676-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDI (h) e o Plasmídeo Double Nickase PDI (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P4HB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDI Anticorpo (C-2): sc-74551
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDI Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400676-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDI Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400676-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O P4HB humano codifica a isomerase de dissulfeto de proteína (PDI), uma oxidorredutase e chaperona multifuncional que catalisa a formação, redução e isomerização de ligações dissulfeto durante o dobramento de proteínas no retículo endoplasmático. A PDI sustenta a proteostase do RE por meio da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e da degradação associada ao RE (ERAD), e participa da sinalização redox via reações de troca tiol–dissulfeto. A atividade desregulada de P4HB/PDI tem sido associada a alterações nas respostas celulares ao estresse, mudanças na capacidade da via secretória e desequilíbrio de proteostase observado em diversos contextos relevantes para doenças, incluindo a biologia do câncer e modelos de neurodegeneração. Como componente central do dobramento oxidativo de proteínas, a PDI é frequentemente estudada em vias que regulam a maturação proteica, a secreção e a homeostase redox.
PDI O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P4HB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P4HB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P4HB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P4HB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.