非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PDE5A 抗体 (D-3): sc-398747. Western 印迹分析 BC3H1 全细胞裂解液中 PDE5A 的表达.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PDE5A双切口酶质粒(m): sc-433880-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PDE5A 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PDE5A双切酶质粒（m）和PDE5A双切酶质粒（m2）编码针对Pde5a的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PDE5A: sc-398747，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PDE5A双切口酶质粒(m) | sc-433880-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDE5A双切口酶质粒(m2) | sc-433880-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Pde5a 基因编码磷酸二酯酶 5A（PDE5A），这是一种 cGMP 特异性的磷酸二酯酶，可通过将 cGMP 水解为 GMP 来终止一氧化氮（NO）–cGMP 信号传导。PDE5A 通过调控细胞内 cGMP 水平来调节蛋白激酶 G（PKG）的活性及其下游过程，包括平滑肌张力、血管反应性、血小板功能以及心肌细胞信号传导。PDE5A 的活性还与利钠肽和可溶性鸟苷酸环化酶通路相互整合，塑造影响细胞稳态的环核苷酸信号“串话”。在心血管重构、肺血管功能障碍以及神经血管调控等模型中，研究者已对 PDE5A 表达改变或 cGMP 通路失衡进行了探究。
PDE5A 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Pde5a 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pde5a内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Pde5a的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Pde5a基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。