PCTAIRE-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405470-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PCTAIRE-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PCTAIRE-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PCTAIRE-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDK16. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PCTAIRE-1 Anticorpo (G6.1): sc-53410
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PCTAIRE-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405470-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PCTAIRE-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405470-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK16 codifica a quinase de serina/treonina PCTAIRE-1, um membro da família CDK que se associa a ciclinas e cofatores regulatórios para controlar programas de fosforilação ligados à progressão do ciclo celular, ao tráfego vesicular, à remodelação do citoesqueleto e ao desenvolvimento neuronal. A atividade de PCTAIRE-1 tem sido relacionada a processos de proteostase e de autofagia, incluindo a modulação de vias de turnover proteico que influenciam as respostas celulares ao estresse. Em células humanas, alterações na expressão de CDK16 ou na sinalização mediada por sua quinase foram relatadas em múltiplos contextos relevantes para doenças, nos quais podem afetar fenótipos de proliferação, migração e diferenciação. Essas propriedades fazem de CDK16 um nó útil para investigar redes de sinalização reguladas por quinases e o cross-talk entre vias em estudos mecanísticos.
PCTAIRE-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDK16 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDK16. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDK16. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDK16 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.