PATZ1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-404881-NIC

PATZ1（POZ/BTB および AT-hook 含有亜鉛フィンガータンパク質1）は核内転写因子であり、亜鉛フィンガーおよび AT-hook モチーフを介して AT リッチな DNA に結合し、増殖・分化・アポトーシスを制御する遺伝子発現プログラムを調節します。PATZ1 は、p53 依存性応答や他の発生・分化に関わる転写回路とのクロストークを含め、転写の抑制および活性化を調節することで、クロマチン関連の制御ネットワークの中で機能します。PATZ1 の発現や活性の破綻は、細胞運命決定やゲノム安定性の変化と関連し、複数の腫瘍コンテキストおよび神経発達表現型にまたがる関連が報告されています。これらの特性により、PATZ1 はヒト細胞モデルにおける転写制御、系譜（リネージ）規定、ストレス応答経路を解析するための有用な標的となります。

PATZ1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における PATZ1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、PATZ1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、PATZ1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、PATZ1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。