PA200 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404513-LAC

ヒトのPSME4は、20Sコア粒子に結合して核内でユビキチン非依存的なタンパク質分解を促進するプロテアソーム活性化因子PA200をコードしている。PA200はDNA損傷応答におけるクロマチン関連タンパク質のターンオーバーに寄与し、転写制御、細胞周期の進行、ゲノム安定性の維持といった過程とも関連している。DNA修復部位におけるプロテアソーム活性の調節や、精子形成に関連したクロマチン再構成プログラムを介して、PA200は遺伝毒性ストレス下でのプロテオスタシス形成に貢献する。PSME4/PA200活性の異常は、プロテアソーム機能の変化やシグナル伝達ネットワークの攪乱と関連づけられており、核内タンパク質恒常性が破綻するがん生物学やその他の疾患との関与が示唆されている。

PA200 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なPSME4の発現上昇を可能にします。

PA200 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、PSME4転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性PA200の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のPSME4ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。