Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
p53 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423509-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p53O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase p53 (m) e o Plasmídeo Double Nickase p53 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Trp53. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p53 Anticorpo (A-1): sc-393031
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p53 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423509-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p53 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423509-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Trp53 do camundongo codifica a p53, um fator de transcrição específico de sequência que integra sinais de dano ao DNA e de estresse oncogênico para manter a estabilidade do genoma. A p53 regula a parada do ciclo celular, a apoptose, a senescência e programas de reparo de DNA por meio de vias que incluem a sinalização ATM/ATR–CHK1/CHK2 e o controle transcricional de alvos como Cdkn1a (p21), Bax e Mdm2. A desregulação de Trp53 compromete o controle de checkpoints e redes transcricionais induzidas por estresse, tornando-o central em estudos de biologia de supressores tumorais, tolerância a mutações e respostas celulares ao estresse genotóxico. Em modelos murinos, o status de Trp53 influencia fortemente a transformação, a vigilância imune e a homeostase tecidual, apoiando investigações mecanísticas em processos relacionados ao câncer e ao envelhecimento.
p53 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Trp53 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Trp53. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Trp53. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Trp53 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.