Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p38 alpha MAPK14 Plasmide Double Nickase (h): sc-400057-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- p38 alpha MAPK14 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il p38 alpha MAPK14 Double Nickase Plasmid (h) e il p38 alpha MAPK14 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAPK14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: p38 alpha MAPK14 Antibody (F-9): sc-271120
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
p38 alpha MAPK14 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400057-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p38 alpha MAPK14 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400057-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK14 codifica p38α, una chinasi serina/treonina attivata dallo stress appartenente alla famiglia delle MAPK, che integra segnali provenienti da citochine infiammatorie, stress ossidativo e stimoli ambientali. p38α regola cascate di fosforilazione che controllano programmi trascrizionali, la stabilità dell'mRNA e la traduzione proteica tramite vie che includono MAPKAPK2/3, ATF2 e la modulazione a valle di risposte collegate a NF-κB e AP-1. Influenza l'apoptosi, i checkpoint del ciclo cellulare, la differenziazione e la segnalazione dell'immunità innata, con un ampio impatto sulla produzione di citochine e sull'adattamento cellulare allo stress. Una segnalazione di MAPK14 deregolata è stata implicata in processi infiammatori e autoimmuni, nella neurodegenerazione e nella segnalazione del microambiente associato ai tumori, rendendolo un bersaglio frequente negli studi meccanicistici delle vie di segnalazione.
p38 alpha MAPK14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAPK14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAPK14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAPK14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAPK14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.