P2Y9 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-429620

개요

Lpar4는 퓨린성 수용체인 P2Y9을 암호화하며, 이는 세포외 핵산/지질 매개 신호전달에 관여하는 G 단백질 결합 수용체(GPCR)로서 세포 간 커뮤니케이션, 세포막 인접 부위의 2차 전달자 연쇄반응, 그리고 환경(맥락)에 따라 달라지는 이동성 및 분화 조절에 영향을 준다. 마우스 시스템에서 P2Y 계열 신호전달은 흔히 세포내 칼슘 동역학, cAMP 균형, 그리고 세포골격 재구성과 전사 반응을 조정하는 하위 키나아제 네트워크를 제어하는 경로로 수렴한다. 따라서 Lpar4/P2Y9 활성은 면역세포 이동, 기질–상피 간 상호작용, 조직 항상성 연구와 관련성이 크다. GPCR 구동 퓨린성 신호전달의 이상 조절은 염증성 및 섬유화성 표현형, 그리고 변형된 성장 신호와 연관되어 보고되어 왔기 때문에, Lpar4는 기전적 경로를 규명하기 위한 유용한 분석 노드가 된다.

P2Y9 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Lpar4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Lpar4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Lpar4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P2Y9 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P2Y9 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Lpar4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P2Y9 기능에 중요한 Lpar4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Lpar4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P2Y9 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 P2Y9 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Lpar4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P2Y9 HDR 플라스미드 (m) 및 P2Y9 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Lpar4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Lpar4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.