OSR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406034

Panoramica

OSR1 (odd-skipped related transcription factor 1) codifica un fattore di trascrizione a dita di zinco che regola le decisioni sul destino cellulare e la definizione dei pattern tissutali durante lo sviluppo embrionale. Nelle cellule umane, OSR1 influenza programmi trascrizionali legati alla differenziazione mesenchimale, all’organogenesi e all’organizzazione della matrice extracellulare, con effetti a valle su processi quali le interazioni epitelio-mesenchimali e la morfogenesi. Un’espressione deregolata di OSR1 è stata associata ad anomalie dello sviluppo ed è stata riportata in studi di biologia tumorale, in cui alterazioni dei programmi di differenziamento e dello stroma contribuiscono ai fenotipi di malattia. In quanto proteina nucleare legante il DNA, OSR1 è comunemente studiata per il suo ruolo nella regolazione trascrizionale e nelle vie di specificazione del lignaggio.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO OSR1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene OSR1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del OSR1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto OSR1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina OSR1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di OSR1 per lo studio della segnalazione di OSR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni OSR1 critici per la funzione di OSR1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di OSR1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal OSR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal OSR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus OSR1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal OSR1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR OSR1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia OSR1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio OSR1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.