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Nurr1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400289-LAC | 200 µl | $455.00 |
NR4A2 编码孤儿核受体 Nurr1,这是一种不依赖配体的转录因子,可调控控制神经元分化、突触维持以及炎症基调的基因程序。Nurr1 通过与共调节因子和反应元件相互作用来调节转录,影响与多巴胺能神经元身份、线粒体稳态以及小胶质细胞激活相关的通路。在人类生物学中,NR4A2 表达或活性异常与神经退行性和神经精神疾病相关机制有关,包括多巴胺能功能障碍和神经炎症。这些特点使 NR4A2/Nurr1 成为一个被广泛研究的转录网络关键节点,可将细胞应激反应与神经元及免疫表型相耦联。
Nurr1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 NR4A2 表达。
Nurr1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在NR4A2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Nurr1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 NR4A2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。