NUDT8 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425987-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NUDT8O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NUDT8 (m) e o Plasmídeo Double Nickase NUDT8 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nudt8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NUDT8 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425987-NIC | 20 µg | $410.00 |
Nudt8 codifica a NUDT8, um membro da família de hidrolases Nudix implicado na “limpeza” do pool celular de nucleotídeos ao hidrolisar derivados difosfato de nucleotídeos potencialmente mutagênicos ou com atividade de sinalização. Ao regular a abundância de nucleotídeos oxidados ou não canônicos, a NUDT8 pode influenciar a fidelidade da replicação do DNA, as respostas ao estresse associadas ao estado redox e vias do metabolismo de nucleotídeos que se conectam à homeostase mitocondrial e peroxissomal. A desregulação dessa sanitização de nucleotídeos é amplamente relevante para a instabilidade genômica e fenótipos de estresse inflamatório, tornando o Nudt8 um alvo útil para investigar mecanismos que acoplam o estado metabólico à suscetibilidade a danos no DNA. Estudos de Nudt8 em camundongos podem ajudar a esclarecer papéis tecido-específicos de enzimas Nudix no manejo do estresse oxidativo e no controle de qualidade de ácidos nucleicos.
NUDT8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nudt8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nudt8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nudt8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nudt8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.