Plásmido Doble Nickase (h) Nrf3: sc-404543-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Nrf3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Nrf3 (h) y el plásmido de doble nickasa Nrf3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NFE2L3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Nrf3 | sc-404543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Nrf3 | sc-404543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFE2L3 codifica el factor de transcripción bZIP de tipo cap’n’collar Nrf3, un regulador de la expresión génica sensible al estado redox y de los programas de proteostasis. Nrf3 participa en la señalización del estrés oxidativo y se integra con procesos asociados al retículo endoplásmico (RE), incluido el control transcripcional de subunidades del proteasoma que determinan el recambio proteico y la adaptación celular. En células humanas, la actividad desregulada de Nrf3 se ha vinculado con alteraciones en la proliferación, la diferenciación y la tolerancia al estrés, lo que la hace relevante para estudios de biología tumoral y de microambientes inflamatorios. Su conectividad de vía con redes de respuesta antioxidante y con la función ubiquitina–proteasoma respalda investigaciones mecanísticas sobre cómo las células mantienen la homeostasis bajo estrés metabólico y genotóxico.
Nrf3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NFE2L3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NFE2L3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NFE2L3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NFE2L3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.