Nrf2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421869-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nrf2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nrf2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Nrf2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nfe2l2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nrf2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421869-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nrf2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421869-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Nfe2l2 de camundongo codifica o Nrf2, um fator de transcrição bZIP que coordena a defesa celular contra estresse eletrofílico e oxidativo ao se ligar a elementos de resposta antioxidante (AREs) e induzir genes de desintoxicação, redox e proteostase. Em condições basais, a atividade do Nrf2 é restringida por ubiquitinação dependente de KEAP1 e degradação proteassomal, enquanto sinais de estresse estabilizam o Nrf2 para remodelar programas transcricionais envolvendo metabolismo da glutationa, regeneração de NADPH e vias de depuração de xenobióticos. A sinalização de Nrf2 se intersecta com redes inflamatórias e metabólicas, incluindo interação com NF-κB e a homeostase mitocondrial, moldando respostas adaptativas a estressores ambientais e endógenos. A desregulação do eixo KEAP1–Nrf2 está implicada em modelos de carcinogênese, estados inflamatórios crônicos, neurodegeneração e disfunção metabólica, tornando o Nfe2l2 um alvo comum para estudos mecanísticos de resiliência ao estresse e biologia redox.
Nrf2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nfe2l2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nfe2l2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nfe2l2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nfe2l2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.