Nrf2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400017-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nrf2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nrf2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nrf2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NFE2L2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nrf2 Anticorpo (H-6): sc-518033
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nrf2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400017-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nrf2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400017-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFE2L2 codifica o fator nuclear relacionado ao eritroide 2 (Nrf2), um fator de transcrição do tipo zíper de leucina básico que coordena a defesa celular contra estresse oxidativo e eletrofílico. Após sua estabilização e translocação para o núcleo, o Nrf2 liga-se a elementos de resposta antioxidante para induzir genes envolvidos na síntese de glutationa, na detoxificação de xenobióticos, na regeneração de NADPH e na proteostase, integrando o controle redox ao metabolismo e à sinalização inflamatória. Essa via se cruza com a ubiquitinação dependente de KEAP1, a sinalização por MAPK e a regulação da autofagia, modulando as respostas à disfunção mitocondrial e a tóxicos ambientais. A atividade desregulada de Nrf2 tem sido associada a alterações na tolerância ao estresse e à reprogramação metabólica em diversos contextos relevantes para doenças, incluindo carcinogênese, neurodegeneração e estados inflamatórios crônicos.
Nrf2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NFE2L2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NFE2L2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NFE2L2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NFE2L2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.