Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402753-LAC

CHRNA9は、ニコチン性アセチルコリン受容体のα9サブユニットをコードしており、リガンド作動性イオンチャネルの構成要素として他のサブユニットと会合し、アセチルコリン刺激による陽イオン流入およびそれに続くCa2+依存性シグナル伝達を媒介します。CHRNA9に関連する受容体活性は、膜興奮性、シナプス性および非神経性のコリン作動性シグナル伝達、ならびにイオン恒常性やセカンドメッセンジャー・カスケードに結び付いた経路を介する細胞応答の調節に影響します。ヒト組織では、CHRNA9発現や受容体機能の変化が感覚系および炎症関連の生物学と関連付けられており、がんに関連するシグナル伝達フェノタイプや、コリン作動性経路の制御破綻を伴うその他の疾患の文脈で研究されてきました。そのため、CHRNA9は、ニコチン性受容体サブユニットの組成、刺激依存的な転写プログラム、そしてコリン作動性シグナルによって駆動される細胞状態遷移を解析するうえで有用な標的です。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCHRNA9の発現上昇を可能にします。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CHRNA9転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCHRNA9ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。