Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416614-LAC

CHRNA7はニコチン性アセチルコリン受容体（nAChR）のα7サブユニットをコードしており、高いCa²⁺透過性をもつホモ五量体のリガンド作動性イオンチャネルである。これはコリン作動性シグナル伝達を、迅速な膜脱分極および下流のセカンドメッセンジャー・カスケードへと結び付ける。神経細胞およびグリアでは、α7 nAChR活性がシナプス可塑性、神経伝達物質放出、ならびにMAPK/ERKやPI3K/AKTシグナルを含むCa²⁺依存性経路に影響する。一方、免疫系や上皮の文脈では、サイトカイン産生や細胞の興奮性を調節し得る。CHRNA7の発現や機能の異常は、統合失調症やてんかんに関連するエンドフェノタイプを含む神経精神・神経発達の表現型と関連付けられており、アルツハイマー病や炎症生物学の分野でも研究されてきた。リガンド結合と細胞内シグナル伝達を統合する細胞表面受容体として、CHRNA7は神経分化、ネットワーク活動、刺激誘発性カルシウム動態のモデルで頻繁に解析されている。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCHRNA7の発現上昇を可能にします。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CHRNA7転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCHRNA7ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。