NGF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400292-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NGFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NGF (h) e o Plasmídeo Double Nickase NGF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NGF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NGF Anticorpo (B-4): sc-518166
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NGF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400292-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NGF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400292-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O fator de crescimento nervoso (NGF) é uma neurotrofina secretada que se liga ao receptor tirosina-quinase TrkA (NTRK1) e ao receptor de neurotrofinas p75 (NGFR) para regular a sobrevivência neuronal, a diferenciação e o crescimento de neuritos. A sinalização de NGF envolve as vias MAPK/ERK, PI3K–AKT e PLCγ, coordenando programas transcricionais, a dinâmica do citoesqueleto e a manutenção sináptica em contextos do sistema nervoso periférico e central. Para além do neurodesenvolvimento, o NGF contribui para a comunicação neuroimune e pode modular a sensibilização de nociceptores e respostas inflamatórias por meio de sinalização dependente de receptor. A expressão ou sinalização desregulada de NGF tem sido associada a processos neurodegenerativos, mecanismos de dor crónica e alterações da plasticidade neural, tornando o NGF um alvo amplamente estudado na biologia do sistema nervoso.
NGF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NGF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NGF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NGF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NGF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.