Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NFS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403102-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NFS1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NFS1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NFS1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NFS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NFS1 Anticorpo (B-7): sc-365308
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NFS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403102-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NFS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403102-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFS1 codifica uma cisteína dessulfurase que inicia a biogênese de novo de clusters ferro–enxofre (Fe–S) nas mitocôndrias, mobilizando enxofre a partir da L-cisteína e transferindo-o para a maquinaria de montagem ISC. Por meio dessa via, NFS1 dá suporte à maturação de enzimas dependentes de Fe–S envolvidas na fosforilação oxidativa, no metabolismo do ácido lipóico e na manutenção da integridade dos genomas mitocondrial e nuclear. Alterações em NFS1 podem comprometer a respiração mitocondrial e a homeostase redox, com efeitos a jusante sobre a proliferação celular e respostas ao estresse. Estudos genéticos e funcionais relacionam a montagem deficiente de clusters Fe–S a fenótipos de doenças mitocondriais multissistêmicas, tornando NFS1 um alvo-chave para investigações mecanísticas de vulnerabilidade metabólica e manutenção do genoma.
NFS1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NFS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NFS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NFS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NFS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.