Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NFKBIA/IkB alpha Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421878-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NFKBIA/IkB alphaO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NFKBIA/IkB alpha (m) e o Plasmídeo Double Nickase NFKBIA/IkB alpha (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nfkbia. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NFKBIA/IkB alpha Anticorpo (H-4): sc-1643
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NFKBIA/IkB alpha Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421878-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Nfkbia** em camundongo codifica a **NFKBIA/IκBα**, um inibidor citoplasmático que se liga a dímeros de **NF-κB** (incluindo **RELA/p50**) e os mantém fora do núcleo em condições basais. Após sinalização inflamatória ou de estresse, a fosforilação dependente de **IKK** desencadeia a ubiquitinação e a degradação proteassomal de **IκBα**, permitindo a translocação nuclear do NF-κB e o controle transcricional de citocinas, fatores de sobrevivência e reguladores de retroalimentação. Essa proteína é central na sinalização canônica de NF-κB e interage com as vias de **TNF**, **IL-1**, **TLR** e receptores de antígeno, moldando respostas imunes inatas e adaptativas. A desregulação da função de **Nfkbia** ou alterações no turnover de **IκBα** têm sido associadas a inflamação aberrante, estados de ativação de células imunes e contextos de sinalização oncogênica nos quais a atividade de NF-κB está constitutivamente ativada.
NFKBIA/IkB alpha O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nfkbia em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nfkbia. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nfkbia. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nfkbia interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.