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NCAM-L1双切口酶质粒(h) | sc-401012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NCAM-L1双切口酶质粒(h2) | sc-401012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 L1CAM 基因编码神经细胞黏附分子 L1(NCAM-L1)。该蛋白属于跨膜型免疫球蛋白(Ig)超家族成员,可介导同源性与异源性黏附,从而协调神经突起生长、轴突导向以及神经元迁移。NCAM-L1 通过涉及 ankyrin 连接、MAPK/ERK 与 PI3K 信号通路以及对生长锥动态的调控等机制,参与细胞骨架重塑与信号转导。在神经系统之外,L1CAM 也支持细胞—细胞相互作用和细胞运动相关程序,影响组织结构的形成与维持。L1CAM 的异常表达或突变与神经发育障碍有关,并在多种癌症中被研究作为侵袭行为的标志物,提示黏附信号与疾病相关表型存在关联。
NCAM-L1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 L1CAM 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对L1CAM内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏L1CAM的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了L1CAM基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。