Myf-5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400449-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myf-5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Myf-5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Myf-5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MYF5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myf-5 Anticorpo (B-2): sc-518039
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myf-5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400449-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Myf-5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400449-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYF5 codifica o fator de transcrição de hélice–alça–hélice básica (bHLH) Myf-5, um fator regulador miogênico precoce que ajuda a especificar a linhagem do músculo esquelético e a iniciar a determinação de mioblastos. O Myf-5 atua por meio da ligação ao DNA em caixas E (E-box) e do controle transcricional cooperativo com outros MRFs e cofatores para regular genes envolvidos na miogênese, na saída do ciclo celular e na diferenciação. Sua atividade interage com vias de sinalização do desenvolvimento como WNT, SHH e NOTCH, que moldam decisões de destino de progenitores musculares. A desregulação da expressão de MYF5 ou de programas miogênicos é relevante para estudos de miopatias congênitas, atrofia muscular e regeneração, e em contextos tumorais em que marcadores de linhagem miogênica são expressos de forma aberrante.
Myf-5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MYF5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MYF5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MYF5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MYF5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.