Myc Double Nickaseプラスミド (h): sc-400001-NIC

MYCはMyc転写因子をコードしており、RNAポリメラーゼII依存的な転写プログラムを制御することで、細胞増殖、代謝、ならびに細胞増殖（プロリフェレーション）を統括する中枢的レギュレーターである。Mycはリボソーム生合成、ヌクレオチドおよびアミノ酸代謝、ミトコンドリア機能、細胞周期の進行を協調的に制御し、MAPK/ERKやPI3K/AKTなどの経路からの有糸分裂促進性シグナルを統合する。MYC活性の異常は、がん化（腫瘍化）、ゲノム不安定性、分化の変容と強く関連しており、がん生物学における代表的なドライバーとして広く研究されている。さらにMycはクロマチンのアクセシビリティや転写の増幅にも影響するため、MYCの攪乱は遺伝子制御ネットワークや状況依存的な脆弱性をマッピングする目的でしばしば用いられる。

Myc ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における MYC 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、MYC内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、MYCの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、MYCが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。