Muskelin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409182-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MuskelinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Muskelin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Muskelin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MKLN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Muskelin Anticorpo (C-12): sc-398956
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Muskelin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409182-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Muskelin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409182-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKLN1 codifica a muskelina, uma proteína de scaffolding multidomínio que liga receptores de superfície celular ao tráfego intracelular e à organização do citoesqueleto. A muskelina tem sido implicada em processos de endocitose e transporte vesicular e contribui para o controle espacial de complexos proteicos que influenciam a adesão celular, a morfologia e a dinâmica de sinalização. Por meio dessas funções, MKLN1 pode modular vias que dependem do turnover de receptores e do transporte associado a microtúbulos ou actina, moldando respostas celulares dependentes do contexto. Funções desreguladas de tráfego e scaffolding associadas à muskelina foram relacionadas na literatura a alterações de comportamento celular relevantes para a biologia do câncer e para processos neurobiológicos, sustentando sua investigação como um nó mecanístico em modelos pertinentes a doenças.
Muskelin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MKLN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MKLN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MKLN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MKLN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.