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mucolipin 2双切口酶质粒(h) | sc-415216-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mucolipin 2双切口酶质粒(h2) | sc-415216-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCOLN2 编码黏液脂蛋白 2(mucolipin 2,TRPML2),这是一种定位于内体/溶酶体的阳离子通道,负责调控囊泡内离子稳态与膜运输。TRPML2 通过调节腔内离子组成,并促进膜融合与货物处理,从而参与内体–溶酶体成熟、自噬通量以及吞噬体功能。它与先天免疫信号传导及炎症反应密切相关,尤其在髓系细胞和上皮细胞中,内体/溶酶体动力学会影响抗原处理与受体周转。TRPML 家族通道的失调与溶酶体应激表型及免疫细胞功能改变有关,因此 MCOLN2 是在疾病相关模型中研究以溶酶体为中心机制的一个有用靶点。
mucolipin 2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MCOLN2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCOLN2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MCOLN2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MCOLN2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。