MRP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400601-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MRP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MRP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABCC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRP2 Anticorpo (G-1): sc-518048
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400601-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MRP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400601-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCC2 codifica o transportador humano da família ATP-binding cassette MRP2 (ABCC2), uma bomba de efluxo apical que exporta conjugados de glutationa, glucuronídeo e sulfato, bem como uma variedade de xenobióticos, através de epitélios polarizados. A MRP2 sustenta a desintoxicação e a formação da bile ao acoplar a hidrólise de ATP ao transporte canalicular em hepatócitos e contribui para a função de barreira no intestino e no rim. Ao regular a exposição intracelular a metabólitos e fármacos, a atividade de ABCC2 influencia a farmacocinética e as respostas celulares ao stress, cruzando-se com vias que controlam o stress oxidativo, o metabolismo de conjugação e a sinalização inflamatória. A deficiência genética ou funcional de ABCC2 está associada a fenótipos de hiperbilirrubinémia conjugada, como a síndrome de Dubin–Johnson, e é amplamente estudada pelo seu papel no destino dos fármacos e nos mecanismos de resistência a múltiplos fármacos.
MRP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABCC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABCC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABCC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABCC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.