MRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421613-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRP1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MRP1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MRP1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Abcc1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRP1 Anticorpo (IU2H10): sc-53130
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421613-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421613-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Abcc1 do camundongo codifica a proteína 1 associada à resistência a múltiplas drogas (MRP1/ABCC1), um transportador da família ABC (ATP-binding cassette) que exporta uma ampla gama de ânions orgânicos, conjugados de glutationa e de glicuronídeo e mediadores lipídicos através da membrana plasmática. A MRP1 contribui para a desintoxicação celular e para a homeostase redox ao acoplar o efluxo de xenobióticos ao metabolismo dependente de glutationa, influenciando a sinalização intracelular por meio da regulação do transporte de leucotrienos e prostaglandinas. Esse transportador se integra a vias envolvidas em respostas ao estresse oxidativo, sinalização inflamatória e função de barreira, e é frequentemente estudado no contexto de fenótipos de resistência a múltiplas drogas em modelos de câncer. O Abcc1 também fornece um ponto funcional para investigar a variabilidade farmacocinética e processos de transporte tecido-específicos em sistemas murinos.
MRP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Abcc1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Abcc1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Abcc1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Abcc1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.