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MRP-S18CCRISPR激活质粒(h) | sc-412094-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
MRP-S18CCRISPR激活质粒(h2) | sc-412094-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
MRPS18C 编码人线粒体核糖体蛋白 S18C(MRP‑S18C),它是线粒体核糖体 28S 小亚基的组成成分,参与翻译由线粒体基因组编码的氧化磷酸化(OXPHOS)多肽。通过支持呼吸链亚基的合成,MRP‑S18C 有助于维持线粒体蛋白稳态、电子传递链的组装以及 ATP 生成,从而与细胞能量稳态和线粒体应激反应相关。线粒体核糖体功能的扰动会损害线粒体翻译并触发整合性应激信号传导,进而影响氧化还原平衡和代谢重编程。因此,MRPS18C 与线粒体功能障碍以及在生物能量学受损相关疾病中观察到的表型研究密切相关。
MRP-S18C CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MRPS18C的表达。
MRP-S18C CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的MRPS18C基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于MRPS18C转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性MRP-S18C表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的MRPS18C位点,并能够研究内源性位点上依赖于MRP-S18C的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MRPS18C表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟MRP-S18C通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。