MR1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-420785-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- MR1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- MR1ダブルニカースプラスミド（m）およびMR1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Mr1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
MR1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-420785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MR1 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-420785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスMR1（MHCクラスI関連タンパク質1）は、非古典的な抗原提示分子であり、小分子代謝物由来のリガンドに結合して細胞表面に提示し、粘膜関連不変T（MAIT）細胞による認識を可能にします。このMR1–MAIT軸を介して、MR1はバリア組織における免疫監視と迅速なサイトカイン応答に寄与し、細胞の代謝状態を自然免疫様T細胞の活性化へと結び付けます。MR1依存的なシグナル伝達は炎症プログラムや微生物代謝物に対する宿主応答に影響するため、感染、粘膜免疫、炎症性疾患モデルにおける免疫制御の研究で重要性があります。さらに、リガンドの利用可能性が免疫機能をどのように規定するかを理解する目的で、腫瘍免疫学や代謝性炎症の文脈においても、MR1の提示の変化およびMAIT細胞活性が検討されています。
MR1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Mr1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Mr1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Mr1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Mr1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。