MOX-2 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403723-ACT

ヒトMEOX2は、ホメオボックス型転写因子MOX-2をコードしており、間葉系分化、血管細胞の挙動、ならびに組織パターニングに影響する発生過程の遺伝子発現プログラムを制御する核内レギュレーターです。MOX-2は、系譜（ラインエージ）決定や細胞外マトリックスのリモデリングを制御する転写ネットワークに組み込まれ、内皮細胞および平滑筋細胞の生物学における役割や、状況依存的な細胞周期・ストレス応答遺伝子の制御が報告されています。MEOX2活性の変化は血管機能障害や異常な分化状態と関連づけられており、血管新生、線維化様リモデリング、発生制御の破綻に関する研究において重要です。転写制御因子として、MOX-2は下流標的や経路間相互作用を同定するため、発現プロファイリングやクロマチン解析ベースのアッセイで一般的に検討されています。

MOX-2 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性MEOX2の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

MOX-2 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における MEOX2 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はMEOX2転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性MOX-2の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のMEOX2遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるMOX-2依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびMEOX2発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるMOX-2経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。