Plasmide Double Nickase (h) MMP9: sc-400083-NIC

MMP9 (matrix metallopeptidase 9) code une endopeptidase sécrétée, dépendante du zinc, qui dégrade des composants de la matrice extracellulaire tels que le collagène de type IV et la gélatine, coordonnant le remodelage tissulaire et le renouvellement de la membrane basale. L'activité de MMP9 est régulée par l'activation de sa forme zymogène et par l'inhibition exercée par les TIMP, ce qui l'inscrit dans des réseaux de protéases modulant la migration cellulaire, la dynamique d'adhérence et la signalisation inflammatoire. Elle participe à des processus tels que l'angiogenèse, l'extravasation des leucocytes et la réparation des plaies, et est fréquemment étudiée dans le contexte de programmes de remodelage de la MEC en aval des cytokines, des facteurs de croissance et des voies MAPK/NF-κB. Une expression ou une activité dérégulée de MMP9 a été associée à la biologie de l'invasion et des métastases tumorales, au remodelage cardiovasculaire, aux troubles inflammatoires chroniques et à la neuroinflammation.

MMP9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MMP9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MMP9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MMP9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MMP9.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.