Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MMP-21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414131
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MMP-21 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MMP-21, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MMP-21 Anticuerpo (C-7): sc-398935
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MMP-21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-414131 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MMP21 codifica la metaloproteinasa de matriz 21 (MMP-21), una endopeptidasa secretada y dependiente de zinc que contribuye a la remodelación de la matriz extracelular al escindir sustratos de la matriz y de la superficie celular. Como parte de la red de proteasas MMP, MMP-21 influye en la proteólisis pericelular, la dinámica de la membrana basal y la señalización célula–matriz que configuran las interacciones epitelio–mesénquima. Estas actividades se cruzan con vías vinculadas a programas de migración e invasión, incluidas la adhesión mediada por integrinas, la biodisponibilidad de factores de crecimiento y la remodelación tisular inflamatoria. Se ha descrito una expresión alterada de MMP21 en múltiples contextos patológicos en los que un recambio anómalo de la matriz acompaña la progresión de la enfermedad, lo que respalda su valor como nodo mecanístico en la biología de la matriz.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MMP-21 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MMP21 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MMP21 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MMP21 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MMP-21.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MMP21 para la investigación de la señalización de MMP-21, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MMP21 críticos para la función de MMP-21
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MMP21 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MMP-21 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MMP-21 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MMP21. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MMP-21 (h) y el plásmido HDR MMP-21 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MMP21 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MMP21 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.