Met Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400101-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MetO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Met (h) e o Plasmídeo Double Nickase Met (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MET. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Met Anticorpo (D-4): sc-514148
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Met Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400101-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Met Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400101-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MET codifica o receptor do fator de crescimento de hepatócitos (Met), uma tirosina-quinase receptora que inicia programas de sinalização que controlam a proliferação, a sobrevivência, a motilidade e a morfogênese celulares. Após a ligação do HGF e a autofosforilação do receptor, o Met ativa vias que incluem PI3K–AKT, RAS–MAPK/ERK, STAT e sinalização da família SRC, coordenando a dinâmica epitélio–mesênquima e o remodelamento tecidual. A sinalização desregulada de MET está implicada em processos oncogênicos como crescimento invasivo, fenótipos associados à metástase e resistência a perturbações direcionadas a vias, tornando-o um nó central para estudos mecanísticos. MET também é relevante para a biologia do desenvolvimento e da regeneração, em que a sinalização HGF–MET orienta a organogênese e as respostas de reparo de feridas.
Met O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MET em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MET. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MET. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MET interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.