MerTK Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421631-NIC

O gene **Mertk** de camundongo codifica a **MerTK**, uma tirosina-quinase receptora da família TAM que reconhece a fosfatidilserina em células apoptóticas por meio de ligantes ponte, como **GAS6** e **PROS1**, promovendo a eferocitose e a homeostase imunológica. A sinalização de MerTK envolve as vias **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK** e **STAT** para coordenar a remodelação do citoesqueleto, a maturação do fagossomo e programas transcricionais anti-inflamatórios em macrófagos, micróglia, células dendríticas e epitélio pigmentar da retina. A disfunção de **Mertk** tem sido associada à depuração defeituosa de células moribundas, à regulação alterada da imunidade inata e à degeneração tecidual, tornando-o relevante para estudos de neuroinflamação, homeostase retiniana e fenótipos semelhantes aos autoimunes em modelos murinos. Como um nó que integra a captação fagocítica ao ajuste fino de citocinas, MerTK é frequentemente investigada em pesquisas sobre sinalização mieloide e vias de depuração.

MerTK O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mertk em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mertk. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mertk. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mertk interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.