Meis1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401481-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Meis1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Meis1 Double Nickase Plasmid (h) e il Meis1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MEIS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Meis1/2/3 Antibody (9.2.7): sc-101850
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Meis1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401481-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Meis1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401481-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MEIS1 codifica un fattore di trascrizione homeobox della classe TALE che collabora con le proteine PBX e HOX per controllare programmi di espressione genica specifici di linea durante lo sviluppo e l’omeostasi dei tessuti adulti. Nelle cellule ematopoietiche, MEIS1 contribuisce a reti trascrizionali che regolano il mantenimento di cellule staminali/progenitrici, il controllo del ciclo cellulare e la differenziazione, e si interfaccia con vie che governano lo stato della cromatina e l’attività degli enhancer. Un’espressione disregolata di MEIS1 o alterazioni degli enhancer sono state collegate alla leucemogenesi, incluse le leucemie acute con riarrangiamenti MLL, nelle quali può cooperare con programmi del cluster HOXA. MEIS1 è inoltre implicato in processi cardiovascolari e di neurosviluppo, rendendolo un nodo utile per studiare la regolazione trascrizionale in molteplici sistemi d’organo.
Meis1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MEIS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MEIS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MEIS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MEIS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.