MDR1/ABCB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400178-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDR1/ABCB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MDR1/ABCB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MDR1/ABCB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABCB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MDR1/ABCB1 Anticorpo (D-11): sc-55510
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDR1/ABCB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400178-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDR1/ABCB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400178-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCB1 (MDR1/P-glicoproteína) codifica um transportador de efluxo da família ABC (ATP-binding cassette), localizado predominantemente na membrana plasmática, onde utiliza a hidrólise de ATP para exportar uma ampla gama de xenobióticos e metabólitos endógenos. MDR1/ABCB1 contribui para funções de barreira epitelial e proteção tecidual em órgãos como intestino, fígado, rim e na barreira hematoencefálica, influenciando a disposição intracelular de fármacos e as respostas celulares ao estresse. Sua atividade se cruza com vias de desintoxicação e farmacocinética, incluindo regulação coordenada com a sinalização por receptores nucleares (por exemplo, PXR, CAR) e processos de tráfego de membrana que controlam a abundância do transportador na superfície celular. A expressão ou função desregulada de ABCB1 é frequentemente estudada no contexto de fenótipos de resistência a múltiplos fármacos em modelos de câncer e da variabilidade de resposta a medicamentos entre tecidos.
MDR1/ABCB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABCB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABCB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABCB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABCB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.