Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MDMX Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417855-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDMXO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MDMX (h) e o Plasmídeo Double Nickase MDMX (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MDM4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MDMX Anticorpo (G-10): sc-74467
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDMX Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417855-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDMX Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417855-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O MDM4 codifica o MDMX, um importante regulador negativo da via supressora tumoral TP53, que modula programas de transcrição dependentes de p53 responsáveis por controlar a paragem do ciclo celular, a apoptose e as respostas a danos no DNA. O MDMX liga-se ao p53 e coopera com o MDM2 para restringir a atividade do p53, influenciando assim a sinalização de checkpoints e a tolerância celular ao stress. Alterações na expressão de MDM4 ou na função do MDMX têm sido associadas a desregulação da sinalização de p53 em múltiplos contextos relevantes para o cancro e a mecanismos de vigilância genómica comprometidos. Por isso, o MDM4 é amplamente estudado pelo seu papel na reconfiguração de vias oncogénicas, nas respostas ao stress replicativo e na robustez da rede de p53.
MDMX O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MDM4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MDM4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MDM4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MDM4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.