MDC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405652-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDC1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MDC1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MDC1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MDC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405652-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405652-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O mediador do checkpoint de dano ao DNA 1 (MDC1) é uma proteína andaime associada à cromatina que amplifica a sinalização de quebras de dupla fita no DNA ao se ligar à H2AX fosforilada (γH2AX) e coordenar o recrutamento de fatores de reparo e de checkpoint. Por meio de interações com eventos de fosforilação dependentes de ATM e com módulos de sinalização por ubiquitina, o MDC1 favorece a montagem de componentes das vias de 53BP1 e BRCA1, influenciando a escolha de via entre a junção de extremidades não homólogas e a recombinação homóloga. A função do MDC1 é central para o controle dos checkpoints de fase S e de G2/M, para as respostas ao estresse replicativo e para a manutenção da estabilidade genômica. Alterações na sinalização de MDC1 têm sido associadas a fenótipos de instabilidade genômica frequentemente observados na biologia do câncer e em outros distúrbios relacionados ao reparo de DNA.
MDC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MDC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MDC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MDC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MDC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.