MDA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401962-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDA5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MDA5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MDA5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IFIH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401962-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401962-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFIH1 codifica a proteína associada à diferenciação do melanoma 5 (MDA5), uma helicase de RNA citosólica da família DExD/H-box que detecta RNA de dupla fita longo gerado durante a replicação viral. Após a ligação ao RNA, a MDA5 sinaliza por meio de MAVS para ativar IRF3/IRF7 e NF-κB, impulsionando programas de interferon do tipo I e de citocinas pró-inflamatórias que moldam as respostas imunes inata e adaptativa. Essa via interage com a restrição antiviral, a apoptose e a remodelação imunometabólica, e é rigidamente regulada para evitar o reconhecimento aberrante de RNA próprio. A atividade desregulada de IFIH1/MDA5 e a sinalização de interferon têm sido associadas a fenótipos autoinflamatórios e autoimunes e podem influenciar a sinalização inflamatória em contextos de infecção e de imunidade relacionada ao câncer.
MDA5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IFIH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IFIH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IFIH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IFIH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.