Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MCM4 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402451-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- MCM4 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- MCM4 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 MCM4 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 MCM4을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 MCM4 Antibody (G-7): sc-28317
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
MCM4 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-402451-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCM4 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-402451-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM4는 복제 시작점을 라이선싱하고 S기 동안 DNA 가닥을 푸는 미니크로모좀 유지(MCM2–7) 헬리케이스 복합체의 핵심 소단위를 암호화합니다. MCM4는 CDK 및 DDK 신호에 의한 조절을 통해 복제 개시와 신장에 관여하고, 복제 포크의 진행을 조율하며, 복제 스트레스 하에서 유전체 안정성을 유지하는 데 기여합니다. MCM4 기능이 교란되면 DNA 복제 타이밍이 흐트러지고 ATR–CHK1과 같은 체크포인트 경로가 활성화되어, DNA 손상 축적을 방지하는 보호 기전과의 연관성이 드러납니다. MCM4의 발현 변화 또는 기능 이상은 암 생물학 및 DNA 복제·수리의 유전성 질환과 관련된 증식성 표현형과 유전체 불안정성과 연관되어 왔습니다.
MCM4 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 MCM4 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 MCM4 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 MCM4의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, MCM4 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.