MB67 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-401537-ACT
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- MB67 CRISPR Activationプラスミド (h)は、特異的に遺伝子の発現量を増加させるため、相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムです。
- MB67 CRISPR Activationプラスミド (h)は、1:1:1の質量比で以下の3つのプラスミドがら成る：トランス活性化ドメインVP64に溶解する非活性化されたCas9 (dCas9)ヌクレアーゼ(D10A と H840A)をコード化したのプラスミド（ブラストサイジン耐性遺伝子を含めて）、MS2-p65-HSF1融合蛋白質をコード化したのプラスミド（ハイグロマイシン耐性遺伝子を含めて）、2つのMS2 RNAアプタマーに溶解する目標特異的な20ntガイドRNAをコード化したのプラスミド（ピューロマイシン耐性遺伝子を含めて）。
- 得られたSAM複合体は、部位特異的な約200-250nt転写開始点の上流の領域に結合し、転写因子の強いリクルートメントを提供し、遺伝子の高い活性化効果が得られます。
- MB67 CRISPR活性化プラスミド（h）およびMB67 CRISPR活性化プラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NR1I3転写開始点の上流にある異なる調節領域を標的としています。いずれか一方、または両方のデザインが利用可能である可能性があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
MB67 CRISPR Activationプラスミド (h) | sc-401537-ACT | 20 µg | $397.00 |
NR1I3は、核内受容体MB67（CAR）をコードしており、ヒト細胞における異物（キセノバイオティクス）の感知と適応的代謝応答を制御する、リガンド応答性の転写因子である。活性化されると、MB67はRXRとヘテロ二量体を形成し、制御配列に結合して薬物代謝酵素およびトランスポーターの発現を調節する。これにより、シトクロムP450を介した生体内変換、抱合反応、胆汁酸およびビリルビン恒常性といった経路が統合される。さらに、炎症性シグナルや代謝シグナルのネットワークとのクロストークを通じて、NR1I3は肝細胞のストレス応答や全身の脂質・糖代謝の制御にも影響を及ぼす。NR1I3活性の制御異常は、個人間の薬物応答性の違いや、代謝表現型および肝関連表現型への感受性と関連づけられており、解毒機構や内分泌—代謝制御のメカニズム研究における有用性を支持している。
MB67 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性NR1I3の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。
MB67 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における NR1I3 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。
標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はNR1I3転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性MB67の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のNR1I3遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるMB67依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびNR1I3発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるMB67経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。