Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Max Double Nickaseプラスミド (h): sc-400596-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Max Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Maxダブルニカースプラスミド（h）およびMaxダブルニカースプラスミド（h2）は、MAXを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Max 抗体 (H-2): sc-8011
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Max Double Nickaseプラスミド (h) | sc-400596-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Max Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-400596-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトMAXは、塩基性ヘリックス–ループ–ヘリックス／ロイシンジッパー（bHLH-LZ）型の転写因子であるMaxをコードし、MYCファミリータンパク質と二量体を形成して、細胞増殖、代謝、リボソーム生合成、ならびに細胞周期進行を制御するE-box依存的な遺伝子発現プログラムを調節します。Maxはまた、MXD/MNTパートナーと抑制性複合体を形成し、MYCによる転写活性化に拮抗して転写の恒常性維持に寄与します。こうした文脈依存的な活性化／抑制二量体を介して、MAXはMYC/MAX/MADネットワークのシグナル伝達の中で機能し、クロマチン制御とも連携して、系譜や刺激に特異的な転写出力を形作ります。MAX活性の変化、あるいはMYC–MAX軸の破綻は、増殖制御の破綻や腫瘍性の転写状態と関連づけられており、腫瘍生物学、代謝適応、転写制御の観点から研究対象となっています。
Max ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における MAX 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、MAX内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、MAXの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、MAXが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。