Matrilin-2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-404852-NIC

MATN2 はマトリリン2（matrilin-2）をコードしており、マトリリン2はオリゴマー性の細胞外マトリックス（ECM）アダプタータンパク質として、コラーゲン、プロテオグリカン、その他のマトリックス成分をつなぎ、組織構築および細胞—マトリックス間シグナル伝達を支えます。マトリリン2は基底膜および間質マトリックスの構築に寄与し、細胞外マトリックスのリモデリングを調節することで、細胞接着、遊走、創傷修復といった過程に影響します。MATN2 の発現やマトリックスへの取り込みの変化は、線維化リモデリングや炎症性微小環境と関連づけられており、マトリリン2の生物学が結合組織の恒常性やストレス応答と結び付いていることが示唆されます。マトリックス関連因子として、MATN2 は組織の健全性を制御するメカノトランスダクションや細胞外マトリックス経路の研究において重要です。

Matrilin-2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における MATN2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、MATN2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、MATN2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、MATN2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。