MANEA慢病毒激活颗粒(h): sc-413213-LAC

人类 MANEA 基因编码内切 α-甘露糖苷酶（endo-α-mannosidase），这是一种定位于高尔基体的糖苷水解酶，可通过修剪带葡萄糖的高甘露糖型 N-聚糖，为 N-连接糖蛋白的成熟提供一条替代途径。该活性与内质网（ER）质量控制以及下游分泌通路加工相衔接，通过协调影响蛋白质折叠、转运与稳定性的聚糖重塑过程发挥作用。借助其在糖蛋白稳态中的功能，MANEA 会影响细胞蛋白稳态（proteostasis）网络，并可调节糖基化受体与酶的处理过程。N-糖基化通路的异常已与先天性糖基化缺陷病（CDG）以及更广泛的、与蛋白错误折叠和应激反应相关的疾病表型相联系，因此 MANEA 是开展机制研究的一个有价值的节点。

MANEA 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 MANEA 表达。

MANEA 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在MANEA转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性MANEA表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 MANEA 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。