MALT1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400791-LAC

MALT1 (proteína 1 de translocação do linfoma do tecido linfoide associado à mucosa) é uma paracaspase e proteína de suporte (scaffold) que acopla a sinalização do recetor de antigénio à ativação das vias NF-κB e MAPK. No complexo CARD11–BCL10–MALT1 (CBM), promove a sinalização da cinase IκB e cliva substratos selecionados para modular a ativação de linfócitos, a produção de citocinas e programas de sobrevivência celular. A sinalização dependente de MALT1 influencia a homeostase imunitária e as respostas inflamatórias, e a desregulação deste nó tem sido associada a atividade aberrante de NF-κB na biologia linfoide. Como regulador de saídas transcricionais a jusante do envolvimento de recetores imunitários, MALT1 é frequentemente estudada em modelos de reconfiguração da sinalização imunitária e de expressão génica adaptativa ao stress.

As Partículas de Ativação Lentivirais MALT1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de MALT1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais MALT1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição MALT1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de MALT1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo MALT1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.