MACF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402923-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MACF1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MACF1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MACF1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MACF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MACF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402923-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MACF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402923-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MACF1 (fator 1 de ligação cruzada entre microtúbulos e actina) codifica uma grande espectraplaquina que liga fisicamente os microtúbulos à F-actina, coordenando a arquitetura do citoesqueleto, o tráfego intracelular e a migração celular polarizada. Por meio de suas interações com proteínas rastreadoras da extremidade “plus” e com complexos reguladores de actina, o MACF1 favorece a captura de microtúbulos no córtex e contribui para processos como a renovação de adesões focais, o crescimento de neuritos e a organização epitelial. O MACF1 também tem sido implicado na dinâmica de sinalização relacionada a Wnt/β-catenina por meio de funções de arcabouço (scaffolding) que influenciam a localização de componentes da via. A desregulação ou mutação de MACF1 está associada a alterações na motilidade celular e a fenótipos do desenvolvimento, e tem sido relatada em estudos genômicos de transtornos do neurodesenvolvimento e de remodelamento do citoesqueleto relacionado ao câncer.
MACF1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MACF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MACF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MACF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MACF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.