LXR beta/NER/NR1H2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423617

Panoramica

Nr1h2 codifica il recettore X del fegato beta (LXRβ/NER), un recettore nucleare attivato da ligando che funge da regolatore trascrizionale dell’omeostasi dei lipidi e del colesterolo. Nelle cellule di topo, LXRβ forma eterodimeri con RXR per modulare i geni che controllano il trasporto inverso del colesterolo, il metabolismo degli acidi grassi e i programmi genici infiammatori, integrando i segnali metabolici e dell’immunità innata. Questa via interseca la polarizzazione dei macrofagi, la biologia degli adipociti e le risposte neuroinfiammatorie, collegando l’attività di Nr1h2 a meccanismi rilevanti per l’aterosclerosi, la disfunzione metabolica e fenotipi infiammatori del SNC in modelli sperimentali. Poiché LXRβ influenza reti trascrizionali in molteplici tessuti, l’alterazione di Nr1h2 è ampiamente utilizzata per analizzare il crosstalk tra recettori nucleari e la regolazione genica dipendente dal ligando.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LXR beta/NER/NR1H2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Nr1h2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Nr1h2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Nr1h2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LXR beta/NER/NR1H2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Nr1h2 per lo studio della segnalazione di LXR beta/NER/NR1H2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Nr1h2 critici per la funzione di LXR beta/NER/NR1H2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Nr1h2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Nr1h2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal LXR beta/NER/NR1H2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR LXR beta/NER/NR1H2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Nr1h2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Nr1h2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.