LOC729991-MEF2B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405289-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LOC729991-MEF2BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LOC729991-MEF2B (h) e o Plasmídeo Double Nickase LOC729991-MEF2B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BORCS8-MEF2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LOC729991-MEF2B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOC729991-MEF2B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BORCS8-MEF2B codifica um produto proteico quimérico BORCS8–MEF2B (LOC729991-MEF2B) que liga um componente do complexo BORC, o qual regula o posicionamento dos lisossomos e o transporte mediado por cinesina, a MEF2B, um fator de transcrição do tipo MADS-box envolvido na regulação gênica dependente de atividade. A sinalização da família MEF2 integra entradas de cálcio/MAPK para controlar programas transcricionais que governam proliferação, diferenciação e respostas ao estresse, enquanto o tráfego associado ao BORC afeta a autofagia e a homeostase endolisossomal. A desregulação de MEF2B tem sido associada a controle transcricional alterado na biologia linfoide, incluindo alterações genômicas recorrentes relatadas em neoplasias de células B, tornando este locus relevante para dissecar a interação entre transcrição e tráfego em contextos celulares pertinentes a doenças.
LOC729991-MEF2B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BORCS8-MEF2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BORCS8-MEF2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BORCS8-MEF2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BORCS8-MEF2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.