LOC100129480 Double Nickaseプラスミド (h): sc-418668-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- LOC100129480 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- LOC100129480ダブルニカースプラスミド（h）およびLOC100129480ダブルニカースプラスミド（h2）は、MKRN2OSを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
LOC100129480 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-418668-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOC100129480 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-418668-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKRN2OS（ヒト）は、LOC100129480座位に関連するアンチセンス／重複転写産物であり、転写干渉、クロマチン修飾、RNA安定性制御といったRNA媒介機構を介して、座位特異的な遺伝子発現制御に関与すると考えられています。注釈上のタンパク質産物であるLOC100129480は依然として十分に解明されていませんが、そのゲノム上の文脈から、ユビキチン関連シグナル伝達や転写後制御との関連が示唆され、増殖、ストレス応答、分化などの細胞状態の決定に影響し得ます。アンチセンス転写やノンコーディングRNAネットワークの破綻はがんを含む複雑疾患でしばしば観察されるため、MKRN2OS／LOC100129480は、双方向性または重複する座位における遺伝子制御機構を解明する研究標的として有用です。機能解析により、この座位が関連するヒト細胞モデルにおいて、RNAプロセシング、プロテオスタシス関連経路、および下流の転写プログラムにどのような影響を与えるかを明確にする助けになります。
LOC100129480 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における MKRN2OS 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、MKRN2OS内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、MKRN2OSの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、MKRN2OSが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。