LMX1B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402945-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LMX1BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LMX1B (h) e o Plasmídeo Double Nickase LMX1B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LMX1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LMX1B Anticorpo (1D12): sc-293262
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LMX1B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402945-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMX1B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402945-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LMX1B codifica um fator de transcrição homeobox do tipo LIM que regula a especificação do destino celular e o padrão de organização dos tecidos durante o desenvolvimento, com papéis de destaque na dorsalização dos membros, na diferenciação de podócitos renais e na identidade de subtipos neuronais. Por meio de interações com cofatores via seus domínios LIM e de ligação ao DNA pelo seu homeodomínio, LMX1B coordena programas transcricionais que influenciam a organização da matriz extracelular, a dinâmica do citoesqueleto e redes de sinalização de morfógenos. A desregulação genética de LMX1B está ligada à síndrome unha–patela e está associada à disfunção de podócitos e a manifestações renais, tornando-o um alvo relevante para o estudo da regulação gênica do desenvolvimento e da biologia glomerular. Além disso, alterações na expressão de LMX1B têm sido investigadas no contexto de estados de linhagem de células cancerosas e da reconfiguração de redes transcricionais.
LMX1B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LMX1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LMX1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LMX1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LMX1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.