Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LMO7 Double Nickaseプラスミド (h): sc-404373-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- LMO7 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- LMO7ダブルニカースプラスミド（h）およびLMO7ダブルニカースプラスミド（h2）は、LMO7を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: LMO7 抗体 (B-7): sc-376807
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
LMO7 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-404373-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMO7 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-404373-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LMO7（LIM domain only protein 7）は多機能な足場（スキャフォールド）タンパク質で、細胞間接着部位、アクチン細胞骨格、そして核に局在し、上皮の健全性に関わる細胞骨格の組織化、メカノトランスダクション（力学刺激の情報伝達）、および転写プログラムの協調を助けます。接着部位やアクチン関連複合体と相互作用することで、LMO7は細胞形態の制御、接着のリモデリング、ならびに分化や組織構築に影響するストレス応答性シグナル伝達の調節に寄与します。LMO7活性の変化はバリア機能や細胞骨格ダイナミクスの異常と関連しており、その破綻は上皮間葉転換（EMT）、浸潤性の獲得、腫瘍に伴うリモデリングといった文脈にも関与するとされています。これらの特徴から、LMO7はヒト細胞モデルにおける接着依存的シグナル伝達、細胞骨格—核間コミュニケーション、接着部位の恒常性を研究するうえで有用な標的です。
LMO7 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における LMO7 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、LMO7内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、LMO7の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、LMO7が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。